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液滴微流控技術(shù)用于超高通量的酶進(jìn)化篩選

通量是高效藥物篩選的基本要求。微流控技術(shù)有可能成為高通量,甚至超高通量篩選的主流平臺。近期,美國哈佛大學(xué)的 Weitza研究組構(gòu)建了一套基于微流控芯片液滴技術(shù)的超高通量篩選平臺,與現(xiàn)有設(shè)備相比,其篩選通量和速度均有明顯的突破。該研究將分散在油相中的液滴作為納升級反應(yīng)器,每秒鐘可篩選上千個反應(yīng),利用這一系統(tǒng)進(jìn)行酶的定向進(jìn)化篩選,篩選出的突變型辣根過氧化酶的催化速度較其親代酶高10余倍。他們首先對約107個原始樣本進(jìn)行超高通量的初篩,得到大約100個活性較高的突變型辣根過氧化酶,進(jìn)入第二輪篩選。通過第二輪更嚴(yán)格的篩選,得到了更高效的突變型辣根過氧化酶。他們僅僅用了10h就完成了對108 個酶反應(yīng)的篩選,總試劑消耗量小于150μL。與現(xiàn)有技術(shù)相比,該方法的篩選速度提高了1000倍,而費用只是現(xiàn)有技術(shù)的100萬分之一,顯示了巨大的應(yīng)用潛力。詳見:PNAS,2010,107:4004-4009。



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