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“微流控+智能手機(jī)血糖儀” 打造非血糖分子檢測平臺,量化評估DNA過氧化損傷

據(jù)麥姆斯咨詢報(bào)道,美國佛羅里達(dá)國際大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程系納米生物工程和生物電子實(shí)驗(yàn)室的朱雪娜博士和李晨鐘教授最近開發(fā)了一種以智能手機(jī)連用的葡萄糖傳感器為檢測平臺的便攜式傳感器成功地實(shí)現(xiàn)了對DNA過氧化損傷標(biāo)志物的量化測量,為量化評估霧霾污染對人體的DNA過氧化損傷提供了一個有效地及時地分析手段。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢測雖然已經(jīng)取得了標(biāo)志性的發(fā)展,但是很多常規(guī)檢測還是在醫(yī)院里完成。病人需要去醫(yī)院提供樣品,通過一定時間的等待(幾個小時或者幾天不等),才能拿到檢驗(yàn)報(bào)告。現(xiàn)代健康管理工業(yè)正逐步從定期檢測向個人持續(xù)健康檢測轉(zhuǎn)換以便第一時間來預(yù)防和檢測相關(guān)疾病。為了實(shí)現(xiàn)這一轉(zhuǎn)變,工程人員,科學(xué)研究人員以及藥學(xué)研究人員都致力于發(fā)展經(jīng)濟(jì)快速,能實(shí)現(xiàn)即時即地檢測而不需要專業(yè)人員協(xié)助的即時檢測儀器,即point of care testing(POCT)。智能手機(jī)可實(shí)現(xiàn)成像、定位、信號處理及數(shù)據(jù)傳輸?shù)裙δ埽瑢⑵渥鳛橐粋€平臺與各種傳感器技術(shù)結(jié)合用于個人或公共衛(wèi)生監(jiān)測等領(lǐng)域的即時檢測(POCT)是目前的發(fā)展趨勢。在POCT技術(shù)這幾十年發(fā)展過程中,比較成熟的具有代表性的技術(shù)主要包括免疫驗(yàn)孕試紙盒和便攜式血糖儀,這兩種技術(shù)也最具有跟智能手機(jī)系統(tǒng)中的光電器件結(jié)合在一起使用的可能性。然而,免疫試紙盒為基礎(chǔ)的檢測通常被認(rèn)為是定性測量的工具,其只能提供“是”或“否”的答案,并不能精確的進(jìn)行定量測定。另一方面,基于電化學(xué)測量的Clark型血糖儀自1965年Dr. Clerk發(fā)明以來,已被數(shù)千百萬糖尿病患者用于每天監(jiān)測其血糖水平。為了更好的利用這項(xiàng)已經(jīng)完善建立起來的醫(yī)學(xué)檢測技術(shù),來自美國佛羅里達(dá)國際大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程系的朱雪娜博士和李晨鐘教授跟陜西師范大學(xué)的張成孝教授共同研究開發(fā)了一個通用的檢測平臺。這個平臺可以把廣泛應(yīng)用的葡萄糖電化學(xué)檢測和免疫試紙檢測整合在一起,能把任何非葡萄糖檢測物定量轉(zhuǎn)換成葡萄糖,然后用便攜式血糖儀檢測。

大量研究證據(jù)表明重金屬、尾氣顆粒還有霧霾等環(huán)境污染引起的過氧化應(yīng)激損傷和基因突變可對皮膚、肺、肝臟、心肌等組織器官造成損傷。?液中的8-OHdG就是體內(nèi)在自由基攻擊 DNA 或游離核甘酸中的 deoxyguanosine后經(jīng)由生物體內(nèi)之修補(bǔ)酵素修復(fù)后的代謝廢物,并從細(xì)胞內(nèi)排出進(jìn)一步進(jìn)入人體循環(huán)系統(tǒng)并隨尿排出體外。尿液中8-OHdG作為DNA過氧化損傷生物標(biāo)記物已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于調(diào)查人居和 工作環(huán)境對健康的影響和職業(yè)病臨床探索。

李晨鐘教授的團(tuán)隊(duì)利用免疫和納米酶催化反應(yīng)結(jié)合的檢測機(jī)理,結(jié)合該研究室豐富的微機(jī)電(MEMS)芯片的開發(fā)經(jīng)驗(yàn)和世界一流的微納芯片加工的設(shè)施,精巧地設(shè)計(jì)開發(fā)出一種以傳統(tǒng)的血糖儀為檢測平臺并和智能手機(jī)可以連用的智能檢測傳感器,實(shí)現(xiàn)了對非葡萄糖分子的生物標(biāo)記物例如8-OHdG的定量和定性的快速檢測。這種微流控紙芯片傳感器結(jié)合了微流控技術(shù)、納米技術(shù)、熱蠟打印技術(shù),生化技術(shù),將樣品采集,過濾,免疫檢測,酶促轉(zhuǎn)化,電化學(xué)分析,手機(jī)信號存儲,放大, 和數(shù)據(jù)處理等功能精密地集成在一個小型化的生物傳感器系統(tǒng), 并將非葡糖糖生物標(biāo)志物分子轉(zhuǎn)化成葡萄糖進(jìn)而可以利用技術(shù)比較成熟的智能手機(jī)葡萄糖儀實(shí)現(xiàn)對復(fù)雜生物樣品中的DNA損傷標(biāo)識物8-OHdG的高靈敏度檢測。

他們分別用一個小分子8-hydroxy-2’-deoxyguanosine(8-OHdG,DNA 氧化損傷標(biāo)記物)和一個大分子prostate specific antigen(PSA,前列腺特異性抗原)來測試平臺的可行性。通過與商品化的酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA) 試劑盒做比較,這個通用平臺在不犧牲檢測靈敏度的基礎(chǔ)上降低檢測費(fèi)用,縮短檢測時間,擴(kuò)大濃度檢測范圍以及不需要復(fù)雜高級的檢測儀器等各方面都表現(xiàn)卓越。

這種紙芯片傳感器的設(shè)計(jì)主要包括四個工作區(qū) (圖1)包括點(diǎn)樣區(qū),免疫反應(yīng)識別區(qū),葡萄糖酶催轉(zhuǎn)化區(qū)和檢測區(qū),廢物吸收區(qū)。 液體樣品在紙的毛細(xì)滲透力作用下的流動過程中實(shí)現(xiàn)了競爭型(小分子)或者三明治型(中等或者大分子)免疫反應(yīng),蔗糖和納米酶的水解反應(yīng)等過程,最后通過傳統(tǒng)的手機(jī)血糖儀進(jìn)行量化測量。

“微流控+智能手機(jī)血糖儀” 打造非血糖分子檢測平臺,量化評估DNA過氧化損傷 

“微流控+智能手機(jī)血糖儀” 打造非血糖分子檢測平臺,量化評估DNA過氧化損傷 

該技術(shù)可以能達(dá)到的檢測范圍是0.1~100 ng·mL-1, 在檢測時間45分鐘內(nèi),最小能檢測到的8-OHdG濃度是0.1 ng·mL-1。同時他們還測試了檢測平臺的穩(wěn)定性,結(jié)果顯示在三個星期的時間跨度,檢測結(jié)果沒有太大變化,說明檢測平臺非常穩(wěn)定。經(jīng)過與ELISA方法多方面的比較,在不損害靈敏度和測量范圍的基礎(chǔ)上,這個方法呈現(xiàn)智能化,簡單,快速,即時即地,經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)。

除了小分子檢測物例如8-OHdG外,該團(tuán)隊(duì)也證明了這種血糖儀結(jié)合的紙基芯片也可以對蛋白大分子生物標(biāo)志物例如前列腺特異性抗原(PSA的檢測。前列腺特異性抗原(PSA)作為一個代表來評估血糖儀平臺檢測蛋白大分子的能力。

上述研究成果在文章《Using a glucose meter to quantitatively detect disease biomarkers through a universal nanozyme integrated lateral fluidic sensing platform》中有所描述,改論文近期發(fā)表在《生物傳感器與生物電子學(xué)》(Biosensors and Bioelectronics)雜志上。李晨鐘教授現(xiàn)任美國國家基金委工程局生物傳感學(xué)科主任,佛羅里達(dá)國際大學(xué)the Worlds Ahead 杰出教授,也是Biosensors and Bioelectronics期刊的副主編。

論文鏈接:

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0956566318309278?via%3Dihub

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