一種集成微流控系統快速檢測高危型HPV
人類乳頭瘤病毒(HPV)是宮頸癌和其他肛門生殖器官癌癥的病因。HPV的篩查,特別是高危型HPV的檢測,是宮頸癌發病率和死亡率大幅下降的原因。HPV檢測迫切需要快速、準確、經濟、高通量的方法。其中基于微流控的核酸檢測技術已經成為一種有吸引力的即時診斷工具。然而,由于樣品制備復雜、耗時,大多數微流控核酸檢測過程中不包含核酸提取過程,限制了其臨床廣泛應用。近日,清華大學深圳國際生物制造工程實驗室Shengli Mi和Jiajun Huang領導的課題組研發了一種集核酸純化、等溫擴增和實時熒光檢測于一體的微流控系統用于高危型HPV的診斷。相關論文發表于Analyst雜志上。
在本文中,研究人員在設計離心式微流控時增加了核酸純化的步伐,利用Chelex-100樹脂顆粒吸附樣本匯總的雜質和擴增抑制劑,通過離心將顆粒大于微流控管道的Chelex-100分離。通過綜合評估,這是一種簡單、快速有效的核酸純化方法。盡管該方法純化的核酸純度不是很高,但是研究人員巧妙地將對核酸樣本純度要求低的環介導的等溫擴增(LAMP)技術引入微流控,使該體系特異性高,無交叉反應,在多種條件下具有良好的穩定性,半定量結果與qPCR相似,具有良好的檢測性能。此外,從核酸提取到離心操作,再到實時檢測,整個過程在40分鐘內完成,并能夠同時進行40個高通量檢測。由于它的簡單性和可承受性,在資源有限的情況下具有廣泛的潛力提供POCT檢測。
圖2 微流控芯片LAMP方法特異性評估
圖3 微流控芯片LAMP方法的診斷性能
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