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微流控芯片在ctDNA和CTC中的應用

相比傳統腫瘤手術、創傷的檢測方式,液態活檢無創便捷,并且可以實時進行監測,使其成為國際研究領域及臨床領域關注的重點。如今發展較為成熟的技術是ctDNA和CTC。


ctDNA:


ctDNA是腫瘤患者血液中游離的來自腫瘤的DNA(circulating tumor DNA,ctDNA),因為基于ctDNA檢測的液態活檢進入MIT評選的2015年十大突破技術,因而廣受關注。


ctDNA常用數字PCR進行研究,其對微量DNA的檢測,包括微量的突變有廣泛的應用前景,是目前發展的一個重要方向。如今數字PCR可以分為兩類,一個液滴類的數字PCR,還有一個是微流控數字PCR。


微流控芯片數字PCR采用微流控芯片,將PCR反應液分割成數量眾多且體積相等的反應單元,通過檢測擴增后熒光信號呈陽性的反應單元的數量對核酸模板進行定量,具有可絕對定量、靈敏度高等優點。在感染性疾病診斷、腫瘤早期診斷、產前診斷等多個領域顯示出巨大的應用前景。


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數字PCR ctDNA檢測的應用主要是檢測稀有突變和拷貝數變異分析,在基因表達分析以及甲基化位點分析可以準備實現。其對用量使用,試劑的使用,分析,后期非常好的操作性和便捷性。但在通量性等方面還需要繼續提升。


CTC:


循環腫瘤細胞(CTC,CirculatingTumorCell)是存在于外周血中的各類腫瘤細胞的統稱,因自發或診療操作從實體腫瘤病灶(原發灶、轉移灶)脫落,大部分CTC在進入外周血后發生凋亡或被吞噬,少數能夠逃逸并錨著發展成為轉移灶,增加惡性腫瘤患者死亡風險。CTC檢測通過捕捉檢測外周血中痕量存在的CTC,監測CTC類型和數量變化的趨勢,以便實時監測腫瘤動態、評估治療效果,實現實時個體治療。


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循環腫瘤CTC相比ctDNA有自己的優勢,微流控在該領域也有非常重要的作用,由于微流控芯片管道尺寸在微米量級和細胞尺寸匹配,非常適合應用于細胞分選,近些年來,有越來越多的研究者將該技術應用在CTCs的分選上。大家都知道,CTC在血液中非常稀少,如何實現CTC的捕獲是關鍵。如今CTC捕獲有三個關鍵技術瓶頸需要突破。


1、有效提高捕獲率;

2、實現較高細胞純度,保持完整細胞活性。

3、提升通量,包括樣本數量處理能力和樣本體積的處理能力。


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